intactgenomics：PEmax Enzyme

描述

PE pegRNA Synthesis Kit也可以供應

聚集的規則間隔短回文重復序列（CRISPR）/CRISPR關聯（Cas）系統通過CRISPR RNA（crRNA）引導沉默入侵核酸，為細菌和古菌提供對病毒和質粒的適應性免疫^1。CRISPR系統由一個短的非編碼引導RNA（sgRNA）組成，該RNA由一個靶互補CRISPR RNA（crRNA）和一個輔助轉激活crRNA（tracrRNA^）2組成。Prime編輯作為一種精準基因編輯技術越來越受歡迎。主編輯酶是Cas9尼卡酶突變體（H840A）與改良小鼠白血病病毒逆轉錄酶（MMLV-RT）的融合。其中一種優化的引級編輯融合稱為PEmax酶^3-4。這種引發編輯酶使得精確的基因編輯成為可能，無需雙鏈DNA斷裂（DSBs）或供體DNA模板。PEmax需要一種獨特的長gRNA，稱為“pegRNA"，如圖1所示的示意圖。

完整基因組學（IG）^® PEmax酶是純化的重組化磷酸鏈球菌Cas9尼卡酶突變體（H840A）-小鼠莫洛尼白血病病毒逆轉錄酶（MMLV-RT）融合蛋白^3-4，含有C端核定位信號（NLS），用于靶向細胞核。該酶設計用于執行CRISPR引發編輯^3-4。該酶的物理純度為≥85%，由SDS-PAGE通過Coomassie®藍染色評估。

產品來源
：大腸桿菌BL21（DE3）菌株表達化膿性鏈球菌的重組PEmax基因，并配有定制的蛋白質純化標簽。

組件與存儲
PEmax酶套裝包含以下物品。所有成分存放在-20°C。

• PEmax酶

• 5個PEmax貼角緩沖器：20 mM HEPES，100 mM NaCl，5 mM MgCl_2,0.1 mM EDTA，pH 6.5 @ 25 °C

質量控制檢測
PEmax酶不含可檢測RNase、內切酶（撕裂）及非特異性DNase活性。

功能測試
我們已證明，PEmax在體外轉錄合成的pegRNA引導分子存在下具有特異性切口活性（見圖2），體外RT活性（未顯示）。

酶稀釋/儲存緩沖液（可選）：50 mM 三鹽酸鈉，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% 甘油，pH 7.5 @ 25 oC

上海牧榮生物科技有限公司

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